1、使用前将灭菌器内清洗干净，检查进气阀及排气气阀是否灵活有效，并加入适量水。
2、将待灭菌的物品放入灭菌器内，注意不要放得太挤，以免影响蒸汽的流通和灭菌效果。然后加盖旋紧螺旋、密封。
3、加热升温使水沸腾，并由小至大打开排气管(排气阀)，排除冷空气，继续加热升温，再关闭排气管(阀)。
4、让温度随蒸汽压力增高而上升待压力逐渐上升，待蒸汽压力升至所需压力（一般为103.43kPa ，温度则相当于121.3℃）时，控制热源，维持所需时间，持续15-20分钟即可达到灭菌目的。
5、保压到规定时间之后，就停止加热，缓缓排气，待其压力下降至零时，可开盖取物。
1、高压蒸汽灭菌可用于耐高温、高压及不怕潮湿的物品，如普通培养基、生理盐水、纱布、敷料、手术器械、玻璃器材、隔离衣等的灭菌。
